Nephelometrie in was es besteht und Anwendungen

Die Nephelometrie es besteht in der Messung der Strahlung, die durch Partikel (in Lösung oder in Suspension) verursacht wird, wodurch die Leistung der gestreuten Strahlung in einem anderen Winkel als der Richtung der einfallenden Strahlung gemessen wird.

Wenn ein Teilchen in Suspension durch einen Lichtstrahl erreicht wird, wird ein Teil des Lichts reflektiert, ein anderer Teil wird absorbiert, ein anderer Teil wird abgelenkt und der Rest wird übertragen. Wenn das Licht auf ein transparentes Medium trifft, in dem sich eine Suspension von festen Teilchen befindet, wird die Suspension daher trüb beobachtet.

Index

• 1 Was ist Nephelometrie?
  • 1.1 Dispersion der Strahlung durch Partikel in Lösung
  • 1.2 Nephelometer
  • 1.3 Abweichungen
  • 1.4 Metrologische Eigenschaften
• 2 Anwendungen
  • 2.1 Nachweis von Immunkomplexen
  • 2.2 Andere Anwendungen
• 3 Referenzen

Was ist Nephelometrie?

Dispersion der Strahlung durch Partikel in Lösung

In dem Moment, in dem ein Lichtstrahl auf die Partikel einer in Suspension befindlichen Substanz trifft, ändert die Ausbreitungsrichtung des Strahls seine Richtung. Dieser Effekt hängt von folgenden Aspekten ab:

1. Abmessungen des Teilchens (Größe und Form).

2. Eigenschaften der Suspension (Konzentration).

3. Wellenlänge und Intensität des Lichts.

4. Entfernung des einfallenden Lichts.

5. Erfassungswinkel.

6. Brechungsindex des Mediums.

Nephelometer

Das Nephelometer ist ein Instrument zur Messung von Partikeln, die in einer flüssigen Probe oder in einem Gas suspendiert sind. Eine Fotozelle, die in einem Winkel von 90 ° in Bezug auf eine Lichtquelle angeordnet ist, detektiert die Strahlung durch die in der Suspension vorhandenen Partikel.

Auch das von den Partikeln zur Photozelle reflektierte Licht hängt von der Dichte der Partikel ab. Diagramm 1 stellt die grundlegenden Komponenten eines Nephelometers vor:

A.Strahlungsquelle

In der Nephelometrie ist es wichtig, eine Strahlungsquelle mit einer hohen Lichtleistung zu haben. Es gibt verschiedene Arten von Xenon-Lampen und Quecksilberdampflampen, Wolfram-Halogenlampen, Laser-Strahlung, unter anderem.

B. Monochromatorsystem

Dieses System befindet sich zwischen der Strahlungsquelle und der Küvette, so dass auf diese Weise der Einfall von Strahlung mit unterschiedlichen Wellenlängen im Vergleich zur gewünschten Strahlung auf die Küvette vermieden wird.

Andernfalls würden Fluoreszenzreaktionen oder Erwärmungseffekte in der Lösung Abweichungen von der Messung verursachen.

C. Leseküvette

Es ist ein allgemein prismatischer oder zylindrischer Behälter und kann verschiedene Größen haben. In diesem Fall wird die Lösung untersucht.

D. Detektor

Der Detektor befindet sich in einem bestimmten Abstand (normalerweise sehr nahe am Tank) und ist dafür verantwortlich, die von den Partikeln der Suspension dispergierte Strahlung zu erfassen.

E. Lesesystem

Im Allgemeinen ist es eine elektronische Maschine, die Daten empfängt, konvertiert und verarbeitet, in diesem Fall sind es die Messungen, die aus der durchgeführten Studie erhalten werden.

Abweichungen

Jede Messung unterliegt einem Fehlerprozentsatz, der hauptsächlich gegeben ist durch:

Kontaminierte Eimer: In den Küvetten reduziert jedes Agens außerhalb der Untersuchungslösung, das sich innerhalb oder außerhalb der Küvette befindet, das Strahlungslicht auf dem Weg zum Detektor (defekte Küvetten, an den Wänden der Küvette haftender Staub).

Interferenzen: Das Vorhandensein von mikrobiellen Verunreinigungen oder Trübungen verteilt die Strahlungsenergie und erhöht die Intensität der Dispersion.

Fluoreszierende VerbindungenDies sind Verbindungen, die, wenn sie durch die einfallende Strahlung angeregt werden, fehlerhafte und hohe Ablesungen der Dispersionsdichte verursachen.

Konservierung von Reagenzien: die unzureichende Temperatur des Systems könnte ungünstige Bedingungen für die Untersuchung verursachen und würde die Anwesenheit von Trübungsreagenzien oder Ausfällungen hervorrufen.

Schwankungen der elektrischen Leistung: Um zu vermeiden, dass die einfallende Strahlung eine Fehlerquelle darstellt, werden Spannungsstabilisatoren für gleichförmige Strahlung empfohlen.

Metrologische Eigenschaften

Da die Strahlungsleistung der detektierten Strahlung direkt proportional zur Massenkonzentration der Partikel ist, haben nephelometrische Untersuchungen theoretisch eine höhere messtechnische Empfindlichkeit als andere ähnliche Methoden (wie Turbidimetrie).

Außerdem erfordert diese Technik verdünnte Lösungen. Dies ermöglicht, dass Phänomene von Absorption und Reflexion minimiert werden.

Anwendungen

Nephelometrische Untersuchungen nehmen in klinischen Laboratorien eine sehr wichtige Stellung ein. Die Anwendungen reichen von der Bestimmung von Immunglobulinen und Proteinen der Akutphase, Komplement und Koagulation.

Nachweis von Immunkomplexen

Wenn eine biologische Probe ein Antigen von Interesse enthält, wird sie (in einer Pufferlösung) mit einem Antikörper gemischt, um einen Immunkomplex zu bilden.

Die Nephelometrie misst die Menge an Licht, die durch die Antigen-Antikörper-Reaktion (Ag-Ac) gestreut wird, und auf diese Weise werden Immunkomplexe nachgewiesen.

Diese Studie kann auf zwei Arten durchgeführt werden:

Nephelometrie des letzten Punktes:

Diese Technik kann für die Analyse des Endpunkts verwendet werden, in dem der Antikörper der untersuchten biologischen Probe für vierundzwanzig Stunden inkubiert wird.

Der Ag-Ac-Komplex wird unter Verwendung eines Nephelometers gemessen und die Menge an gestreutem Licht wird mit der gleichen Messung verglichen, die vor der Bildung des Komplexes durchgeführt wurde.

Kinetische Nephelometrie

Bei diesem Verfahren wird die Geschwindigkeit der Komplexbildung kontinuierlich überwacht. Die Reaktionsgeschwindigkeit hängt von der Konzentration des Antigens in der Probe ab. Hier werden die Messungen als eine Funktion der Zeit genommen, so dass die erste Messung zum Zeitpunkt "Null" (t = 0) durchgeführt wird.

Die kinetische Nephelometrie ist die am meisten verwendete Technik, da die Studie in 1 Stunde durchgeführt werden kann, im Vergleich zu der langen Zeitperiode der Endpunktmethode. Das Dispersionsverhältnis wird unmittelbar nach Zugabe des Reagens gemessen.

Solange das Reagenz konstant ist, wird daher die Menge an vorhandenem Antigen als direkt proportional zur Geschwindigkeit der Veränderung angesehen.

Andere Anwendungen

Nephelometrie wird im Allgemeinen bei der Analyse der chemischen Qualität von Wasser verwendet, zur Bestimmung der Klarheit und zur Kontrolle der Prozesse seiner Behandlung.

Es wird auch verwendet, um Luftverschmutzung zu messen, in der die Konzentration der Partikel von der Dispersion bestimmt wird, die sie in einem einfallenden Licht erzeugen.

Referenzen

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2. Al-Saleh, M. (s.f.). Turbidimetrie und Nephelometrie. Von pdfs.semanticscholar.org abgerufen
3. Bangs Laboratories, Inc. (s.f.). Von technochemical.com zurückgewonnen
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5. Sasson, S. (2014). Prinzipien der Nephelometrie und Turbidimetrie. Von notesonimmunology.files.wordpress.com abgerufen
6. Stanley, J. (2002). Grundlagen der Immunologie und Serologie. Albany, NY: Lernen von Thompson. Von books.google.co.ve abgerufen
7. Wikipedia. (s.). Nephelometrie (Medizin). Erholte sich von en.wikipedia.org