Was ist einfache Färbung? Top Funktionen
Die einfache Färbung Es ist ein schnelles und einfaches Färbeverfahren, bei dem ein einzelner Farbstoff verwendet wird, weshalb er einfach genannt wird. Es wird hauptsächlich verwendet, um die Morphologie und Organisation der Zellen in einer Probe zu bestimmen.
Natürlich haben die Zellen keine Farbe, daher ist es notwendig, sie sichtbar zu machen, wenn sie im Mikroskop beobachtet werden.
Es ist wichtig zu betonen, dass die Farbstoffe, die bei der einfachen Färbung verwendet werden, basisch mit einer positiven Ladung (kationisch) sein müssen, so dass sie spontan an die Zellwand und das Zytoplasma binden können.
Diese zellulären Strukturen sind negativ geladen. Deshalb wird der positiv geladene Farbstoff von den Zellen angezogen und bindet spontan an diese. Somit sind alle in einer Probe vorhandenen Zellen schnell gefärbt.
Farbstoffe zur einfachen Färbung
Es gibt einige grundlegende Farbstoffe, die im mikrobiologischen Labor verwendet werden können. Die am häufigsten verwendeten sind:
- Methylenblau.
- Kristallviolett.
- Malachitgrün.
- Basic Fuchsin.
Alle diese Farbstoffe funktionieren gut in Bakterien, weil sie positiv geladene (kationische) gefärbte Ionen (Chromophore) haben.
Die Färbezeiten für die meisten dieser Farbstoffe sind relativ kurz. Sie liegen üblicherweise im Bereich von 30 Sekunden bis 2 Minuten, abhängig von der Affinität des Farbstoffs.
Es ist zu beachten, dass vor dem Färben einer Probe durch einfaches Anfärben diese verlängert und auf dem Objektträger (Objektträger) fixiert werden muss; Die erweiterte und fixierte Probe wird als Smear bezeichnet.
Die 6 Schritte, um eine einfache Färbung durchzuführen
Schritt 1
Legen Sie den Objektträger auf ein Färbeständer und tragen Sie den gewünschten Farbstoff auf. Lassen Sie die entsprechende Zeit einwirken.
Normalerweise dauert die einfache Färbung einige Sekunden oder einige Minuten, abhängig vom verwendeten Farbstoff.
Beobachtung
In diesem Schritt ist es wichtig, die empfohlene Zeit für den verwendeten Farbstoff nicht zu überschreiten, da sich Kristalle auf dem Blatt bilden könnten, was sogenannte "Artefakte" erzeugt, die die Morphologie der Zellen verzerren.
Schritt 2
Waschen Sie den Abstrich des Objektträgers sorgfältig mit destilliertem Wasser aus einer Flasche oder auch mit Leitungswasser, das langsam fließt, bis der Ablauf transparent wird. Dies dauert normalerweise 5 bis 10 Sekunden.
Beobachtung
Den Wasserstrahl nicht direkt auf den Abstrich auftragen, um zu verhindern, dass die Probe durch die Kraft beschädigt wird.
Wenn Sie kein destilliertes Wasser haben, können Sie problemlos Leitungswasser verwenden, da dies das Ergebnis der Färbung nicht beeinträchtigt.
Schritt 3
Trocknen Sie die Folie mit saugfähigen Papiertüchern in einer Richtung und ohne zu reiben. Stellen Sie sicher, dass die Unterseite der Folie sauber ist.
Schritt 4
Beobachte den gefärbten Abstrich auf dem Mikroskop. Beginnen Sie mit den am weitesten entfernten Zielen, um den Bereich, den Sie genauer beobachten möchten, richtig zu lokalisieren. Zieländerung, um der Probe näher und näher zu kommen.
Beobachtung
Für die Verwendung der Linse mit der höchsten Vergrößerung (normalerweise 100X) sollte Immersionsöl verwendet werden, da es hilft, dass das Licht besser eindringt und das Bild schärfer wird. Es ist nicht notwendig, ein Deckglas zu verwenden.
Schritt 5
Werfen Sie schließlich alle Proben in einen geeigneten Behälter, der ordnungsgemäß mit "Biohazard" gekennzeichnet ist.
Referenzen
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