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Biochemische Tests geben an, wofür sie wichtig sind
Die biochemische Tests in der Mikrobiologie sind es eine Reihe von chemischen Tests, die an den in einer Probe vorhandenen Mikroorganismen durchgeführt werden, um sie zu identifizieren; Diese Mikroorganismen sind normalerweise Bakterien. Es gibt eine große Anzahl biochemischer Tests für einen Mikrobiologen.
Die Auswahl dieser Tests basiert jedoch auf vorläufigen Befunden wie dem Gram-Färbungsmuster und den Wachstumsmerkmalen, die es ermöglichen, die Bakterien einer bestimmten Kategorie zuzuordnen. Die biochemischen Tests basieren hauptsächlich auf den metabolischen Eigenschaften jeder Art von Bakterien.
Nicht alle Bakterien haben die gleichen Eigenschaften, daher wird untersucht, ob sie ein bestimmtes Enzym haben, indem sie das Substrat hinzufügen und auf die Reaktion warten. Gewöhnlich ist diese Bestimmung durch eine Änderung der Farbe oder des pH-Werts in dem Kulturmedium gegeben.
Oft werden weniger als 15 biochemische Tests benötigt, um ein Bakterium bis auf Speziesniveau sicher zu identifizieren. Die Durchführung von mehr biochemischen Tests kann das Vertrauen in die Identifizierung erhöhen.
Die meisten dieser biochemischen Tests werden in Serum oder Blutplasma durchgeführt. Sie können jedoch auch in anderen biologischen Sekretionen wie Urin, Cerebrospinalflüssigkeit, Pleuraflüssigkeit und Fäkalien unter anderen durchgeführt werden.
Index
- 1 Klassifizierung
- 1.1 Universell
- 1.2 Differentiale
- 1.3 Spezifisch
- 2 Arten von biochemischen Tests
- 2.1 Der Katalase-Test
- 2.2 Der Oxidasetest
- 2.3 Gesalzener Mannitol-Agar-Test (MSA)
- 2.4 Coagulase-Test
- 2.5 Der Ureasetest
- 3 Für was sind die biochemischen Tests?
- 4 Bedeutung
- 5 Referenzen
Klassifizierung
Die biochemischen Tests können in 3 Gruppen eingeteilt werden:
Universal
Sie sind die Tests, die an jeder Probe durchgeführt werden können und die den Mikrobiologen bei den folgenden biochemischen Tests leiten, die durchgeführt werden müssen, um eine zuverlässige Identifizierung zu erhalten.
Beispiel
Der Katalase- und Oxidase-Test.
Differentiale
Dies sind die Tests, die durchgeführt werden, um die in der Probe vorhandenen Mikroorganismen bis zum Spezieslevel zu identifizieren.
Die Identifizierung erfolgt aufgrund der Ergebnisse einer Kombination von Tests, da die einzelnen Ergebnisse für die Identifizierung nicht aussagekräftig genug sind.
Beispiel
IMViC-Tests und Zuckerverwertungstests.
Spezifisch
Sie sind spezifische Tests für eine bestimmte Artengruppe oder Subtypen einer Art. Diese Tests werden normalerweise durchgeführt, um auf der Ebene der Unterarten zu bestätigen oder zu identifizieren. Die einzelnen Tests sind selbst aussagekräftig.
Beispiel
Der γ-Glutamylaminopeptidase-Test.
Arten von biochemischen Tests
Der Katalase-Test
Der Katalase-Test ist ein Test, um das Vorhandensein von Katalase-Enzym durch Zersetzung von Wasserstoffperoxid in Sauerstoff und Wasser nachzuweisen. Eine kleine Menge Bakterien wird zu einem Tropfen Wasserstoffperoxid (3%) auf dem Objektträger gegeben.
Der Katalase-Test ist ein einfacher Test, der von Mikrobiologen verwendet wird, um Bakterienarten zu identifizieren und die Fähigkeit einiger Mikroben zu bestimmen, Wasserstoffperoxid durch die Produktion des Katalase-Enzyms abzubauen.
Wenn Sauerstoffblasen beobachtet werden, bedeutet dies, dass das Bakterium das Katalase-Enzym besitzt, weil es die Zersetzung von Wasserstoffperoxid in Sauerstoff und Wasser katalysiert. Es wird dann gesagt, dass der Organismus Katalase-positiv ist (zum Beispiel: Staphylococcus aureus).
Der Oxidasetest
Dieser Test wird verwendet, um Mikroorganismen zu identifizieren, die das Enzym Cytochromoxidase enthalten (wichtig in der Elektronentransportkette). Es wird häufig verwendet, um zwischen den Familien Enterobacteriaceae und Pseudomadaceae zu unterscheiden.
Cytochromoxidase überträgt Elektronen von der Elektronentransportkette zu Sauerstoff (dem endgültigen Elektronenakzeptor) und reduziert diesen zu Wasser. Im Oxidasetest werden künstliche Donor- und Akzeptormoleküle von Elektronen bereitgestellt.
Wenn der Elektronendonor durch die Wirkung von Cytochromoxidase oxidiert wird, wird das Medium dunkelviolett und wird als ein positives Ergebnis angesehen. Der Mikroorganismus Pseudomonas aeruginosa ist ein Beispiel für ein positives Oxidase-Bakterium.
Gesalzener Mannitol-Agar-Test (MSA)
Diese Art von Test ist sowohl selektiv als auch differentiell. Die MSA wird Organismen auswählen, die in Umgebungen mit hohen Salzkonzentrationen leben können, z. B. Arten von Staphylococcus im Gegensatz zu den Arten von Streptococcus, deren Wachstum unter diesen Bedingungen gehemmt wird.
Die differentielle Komponente in diesem Test ist Zuckermannitol. Organismen, die in der Lage sind, Mannitol als Nahrungsquelle zu verwenden, produzieren Fermentationsnebenprodukte, die sauer sind und daher den pH-Wert des Mediums senken.
Die Azidität des Mediums lässt den pH-Indikator, Phenolrot, gelb werden. Beispiele für Bakterienarten, die mit dieser Methode unterschieden werden können, sind: Staphylococcus aureus (positiv, weil es Mannitol fermentiert) und Staphylococcus epidermidis (negativ, weil Mannit nicht fermentiert).
Coagulase-Test
Coagulase ist ein Enzym, das hilft, Blutplasma zu koagulieren. Dieser Test wird an positiven grampositiven und katalasepositiven Bakterien zur Identifizierung durchgeführt Staphylococcus aureus (positive Koagulase). In der Tat ist Koagulase ein Virulenzfaktor dieser Bakterienart.
Die Bildung von Gerinnseln um eine durch dieses Bakterium verursachte Infektion schützt es wahrscheinlich vor einer Phagozytose. Dieser Test ist sehr nützlich, wenn Sie unterscheiden möchten Staphylococcus aureus anderer Arten von Staphylococcus welche negative Koagulase sind
Der Urease-Test
Dieser Test wird verwendet, um Bakterien zu identifizieren, die Harnstoff unter Verwendung des Enzyms Urease hydrolysieren können. Es wird häufig verwendet, um das Geschlecht zu unterscheiden Proteus von anderen enterischen Bakterien.
Die Hydrolyse von Harnstoff erzeugt Ammoniak als eines seiner Produkte. Diese schwache Base erhöht den pH-Wert des Mediums über 8,4 und der pH-Indikator (Phenolrot) wechselt von gelb zu pink. Ein Beispiel für ein positives Urease-Bakterium ist Proteus mirabilis.
Für was sind die biochemischen Tests?
Biochemische Tests in der Mikrobiologie werden verwendet, um Krankheiten zu diagnostizieren, die durch Mikroben verursacht werden, und um Behandlungen zu überwachen, die zu ihrer Bekämpfung durchgeführt werden. Darüber hinaus werden sie für das Screening von Infektionskrankheiten und deren Prognose eingesetzt.
Die biochemische Identifizierung von Mikroorganismen bietet eine Vorstellung davon, was diese Mikroorganismen können, wobei die Unterscheidung verschiedener Stämme derselben Spezies durch spezifische biochemische Profile möglich ist.
Unterschiede in spezifischen enzymatischen Aktivitäten informieren über die Ökologie, Physiologie oder den natürlichen Lebensraum des Mikroorganismus, die in einigen Fällen als wichtige Information angesehen werden können.
Bedeutung
Die strukturellen Unterschiede in Bezug auf Form, Größe und Anordnung der Bakterien tragen sehr wenig zur Identifizierung bei, da es viele Arten von Bakterien gibt, die eine ähnliche Form, Größe und Anordnung haben.
Aus diesem Grund basiert die Identifizierung von Bakterien letztlich hauptsächlich auf den Unterschieden in ihren biochemischen Aktivitäten.
Jede Bakterienspezies hat eine klar definierte Menge an metabolischen Aktivitäten, die sich von allen anderen Spezies unterscheidet. Diese biochemischen "Fingerabdrücke" sind Eigenschaften, die von bakteriellen Enzymen kontrolliert werden.
Daher sind biochemische Tests wichtig, da sie dem Forscher helfen, die in einer Probe vorhandenen Pathogene korrekt zu identifizieren und auf diese Weise dem Patienten die geeignete Behandlung empfehlen zu können.
Referenzen
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